منتجات

ينتج الضرر التأكسدي لقواعد الحمض النووي عادةً عن تكوين البيورينات المؤكسدة ، خاصةً 7،8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG) و 7،8-dihydro-8-oxoadenine (8-oxoA) ، الأول هو بئر- آفة مطفرة معروفة.نظرًا لأن 8-oxoG يخضع بسهولة لمزيد من الأكسدة مقارنة بالقواعد العادية ، فقد تم فحص إدخال قاعدة أثناء تخليق الحمض النووي مقابل شكل مؤكسد من 8-oxoG في المختبر.تم معالجة قالب اصطناعي يحتوي على آفة 8-oxoG واحدة أولاً بمؤكسدات مختلفة من الإلكترون الواحد أو تحت ظروف أكسجين مفردة ثم تعرض لتمديد التمهيدي المحفز بواسطة جزء Klenow exo- (Kf exo-) ، العجل thymus DNA polymerase alpha (pol alpha) ) أو بوليميريز الحمض النووي البشري بيتا (بولي بيتا).تمشيا مع التقارير السابقة ، يتم إدخال dAMP و dCMP بشكل انتقائي مقابل 8-oxoG مع جميع بوليمرات الحمض النووي الثلاثة.ومن المثير للاهتمام ، أنه تم العثور على أكسدة 8-oxoG للحث على إدخال dAMP و dGMP مقابل الآفة بواسطة Kf exo- مع تثبيط عابر لتمديد التمهيدي o ccurring في موقع القاعدة المعدلة.علاوة على ذلك ، تشكل الآفة كتلة أثناء تخليق الحمض النووي بواسطة بولي ألفا وبول بيتا.تُظهر التجارب باستخدام أوليغنوكليوتيد بقالب معدل 8-أوكسو أ أن كلا من 8-أوكسو أ والشكل المؤكسد من 8-أوكسو أ ، إدخال مباشر لـ dTMP بواسطة Kf exo-.يتوافق التحليل الطيفي الكتلي للقليل النوكليوتيدات المحتوية على 8-أوكسوج قبل وبعد الأكسدة باستخدام IrCl62- مع أكسدة موقع 8-oxoG بشكل أساسي ، مما يؤدي إلى تكوين جزء guanidinohydantoin كمنتج رئيسي.لم يتم الحصول على أي دليل على تكوين المواقع العسيرة.توضح هذه النتائج أن الشكل المؤكسد لـ 8-oxoG ، ربما guanidinohydantoin ، قد يوجه قراءة خاطئة وإدخال خاطئ لـ dNTPs أثناء تخليق الحمض النووي.إذا حدثت مثل هذه العملية في الجسم الحي ، فإنها ستمثل آفة مطفرة نقطية تؤدي إلى تحولات G -> T و G -> C.ومع ذلك ، فإن الشكل المؤكسد المقابل لـ 8-oxoA يُظهر بشكل أساسي الإدخال الصحيح لـ T أثناء تخليق الحمض النووي مع Kf exo-.