منتجات

تتميز المسارات الجزيئية المسببة للأمراض في أمراض الكبد التليف الكبدي مثل فيروس التهاب الكبد C (HCV) والتهاب الكبد المناعي الذاتي (AIH) والتليف الصفراوي الأولي (PBC) بسمات سيئة.غالبًا ما تكون الجينات المعبر عنها تفاضليًا مهمة في التسبب في المرض.قمع التهجين المطروح (SSH) هو نهج على مستوى الجينوم يثري نسخ mRNA المعبر عنها تفاضليًا.كنا نهدف إلى إجراء ملاحظات جديدة للتعبير الجيني التفاضلي في تليف الكبد باستخدام SSH جنبًا إلى جنب مع تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي للنسخ العكسي (RT-PCR).تم فحص نسخ الكبد في تليف الكبد وتليف الكبد AIH و PBC وأنسجة الكبد غير المريضة بواسطة SSH.تم إعادة فرز استنساخ الحمض النووي التكميلي الناتج (cDNA) للتعبير التفاضلي عن طريق التهجين النقطي ثم تسلسلها.تم تحديد التعبير الجيني المحدد بواسطة RT-PCR في الوقت الحقيقي.بعد SSH ، تم إعادة فرز 694 نسخة من أجل التعبير الجيني التفاضلي ، تم ترتيب 145 منها ووجد أنها مشتقة من 89 جينًا مختلفًا.كانت سبعة مستنسخات متجانسة فقط مع تسلسل علامة تسلسل معبر (EST) يشفر الجينات التي ليس لها وظيفة معروفة.تم تأكيد التعبير المنظم لأربعة جينات بواسطة RT-PCR في الوقت الحقيقي: الغشاء 4 عضو من العائلة الفائقة 3 (tetraspanin CO-029) في جميع أشكال تليف الكبد ، بروتين تفاعل القنفذ (HIP) في تليف الكبد AIH و chitinase 3-like-1 (HC gp-39 أو ykl-40) وتكرار حمض الأرجينين الجلوتاميك (RERE) في تليف الكبد HCV.لوحظ تعدد الأشكال الجيني RERE ومتغيرات لصق في جميع الأنسجة التي تم فحصها.تم ترجمة Tetraspanin CO-029 up-Regulation في المقام الأول إلى الخلايا الأقنية الصفراوية.في الختام ، تم إجراء ملاحظات جديدة للتعبير الجيني التفاضلي في تليف الكبد البشري باستخدام SSH كأداة اكتشاف أساسية.على وجه الخصوص ، هناك ما يبرر إجراء مزيد من الدراسات حول جين RERE ومنتجاته في أمراض الكبد المرتبطة بالـ HCV.