منتجات

أحد العوامل التي تمنع التطبيق السريري للطب التجديدي لأمراض الغضروف التنكسية هو مصدر مناسب للخلايا.الخلايا الغضروفية ، وهي النوع الوحيد من الخلايا الغضروفية ، التي تنمو في المختبر في ظل ظروف الاستزراع لتوسيع أعداد الخلايا تفقد نمطها الظاهري جنبًا إلى جنب مع القدرة على توليد نسيج غضروفي زجاجي.في هذه الدراسة ، حددنا أن نظام الاستزراع ثلاثي الأبعاد الخالي من المصل وعوامل النمو (3D) يعيد قدرة الخلايا الغضروفية المارة على تكوين أنسجة غضروفية في المختبر ، وهي عملية تنطوي على sox9. يسمح بتوسيع رقم الخلية (P2) ويتم تربيته بكثافة عالية على أغشية ثلاثية الأبعاد مطلية بالكولاجين من النوع الثاني في وسائط عالية المحتوى من الجلوكوز مع الأنسولين والديكساميثازون (SF3D).تم تمييز الخلايا بعد توسع أحادي الطبقة واتباع ثقافة ثلاثية الأبعاد عن طريق قياس التدفق الخلوي والتعبير الجيني وعلم الأنسجة.تم تمييز التغييرات المبكرة في مسارات تحويل الإشارات أثناء إعادة التمايز الأيوني. أظهرت خلايا P2 ملف تعريف مستضد يشبه السلف بنسبة 99 ٪ CD44 (+) و 40 ٪ CD105 (+) وملف تعريف التعبير الجيني الذي يوحي بالخلايا البينية.عبّر P2 في SF3D عن الجينات الغضروفية والمصفوفة خارج الخلية المتراكمة.تنظيم مستقبلات الأنسولين (IR) مع HNMPA- (AM3) أو مسار PI-3 / AKT كيناز (يتم تنشيطه عن طريق العلاج بالأنسولين) باستخدام Wortmannin الذي يثبط تخليق الكولاجين.HNMPA- (AM3) قلل من التعبير عن جينات Col2 و Col11 و IR بالإضافة إلى Sox6 و -9.أظهرت تحليلات الترسيب المناعي المشترك والترسيب المناعي للكروماتين للخلايا المعالجة بـ HNMPA- (AM3) ارتباط المُنشّطين المُشاركين Sox6 و Med12 مع Sox9 ولكن تقليل ارتباط Sox9-Col2a1. تكوين أنسجة غضروفية تشبه الهيالين جزئيًا عن طريق ربط Sox9-Col2a1 بوساطة الأنسولين.يجب فحص مدى ملاءمة الأنسجة التي تم إنشاؤها عبر هذا النهج للاستخدام في إصلاح المفصل في الجسم الحي.