منتجات

يحدث التراكم النووي لشكل متحور من البروتين النووي Lamin-A ، المسمى Progerin (PG) أو Lamin AΔ50 ، في متلازمة Hutchinson-Gilford Progeria (HGPS) أو Progeria ، وهو مرض الشيخوخة المتسارع.أحد الأعراض الرئيسية لهذا الاضطراب الوراثي هو فقدان الدهون تحت الجلد بسبب الحثل الشحمي الدرامي ، وقد تسببنا بثبات في التعبير عن PG و GFP-Green Fluorescent Protein البشري كعنصر تحكم في خلايا 3T3L1 باستخدام نظام lentiviral لدراسة الخلايا. تأثير تعبير PG في قدرة التمايز لخط الخلية هذا ، أحد أكثر النماذج الشحمية استخدامًا.تم إجراء البروتينات الكمية (iTRAQ) لدراسة تأثير تراكم PG.تم التحقق من صحة العديد من البروتينات المعدلة عن طريق التكتل المناعي و PCR في الوقت الحقيقي.تم تحليل وظيفة الميتوكوندريا بقياس أ) النشاط القاعدي للميتوكوندريا ، ب) إنتاج الأنيون الفائق ، ج) الكفاءة الفردية للمركب المختلف للسلسلة التنفسية. وجدنا أن الإفراط في التعبير عن PG عن طريق توصيل الجين lentivi ral يؤدي إلى انخفاض في معدل الانتشار والعيوب في القدرة الشحمية بالمقارنة مع السيطرة.أظهر التحليل الكمي للبروتينات 181 بروتينًا بشكل كبير (P <0.05) تم تعديله في خلايا preadipocytes معربا عن PG.تضعف وظيفة الميتوكوندريا في الخلايا التي تعبر عن PG.على وجه التحديد ، اكتشفنا زيادة في نشاط المركب I والإفراط في إنتاج أنيون Superoxide.يؤدي الحضانة باستخدام عوامل كاسحة لأنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) إلى انخفاض في تحلل البروتين الذاتي كما يتضح من نسبة LC3-II / LC3-I. يعزز تعبير PG في خلايا 3T3L1 التغييرات في العديد من العمليات البيولوجية ، بما في ذلك بنية الهيكل الخلوي ، واستقلاب الدهون ، والكالسيوم التنظيم والترجمة وطي البروتين وتوليد الطاقة بواسطة الميتوكوندريا.تعزز بياناتنا مساهمة تراكم ROS في النمط الظاهري للشيخوخة المبكرة وتؤسس رابطًا بين الخلل الوظيفي في الميتوكوندريا وفقدان البروتيوستاس في HGPS.