أخبار

هناك العديد من الأبطال المجهولين من حولنا ، والذين يبدو أنهم عاديون ، لكنهم في الحقيقة يساهمون كثيرًا فينا بصمت.بروتيناز K هو "البطل المجهول" في صناعة التشخيص الجزيئي ، على الرغم من مقارنته بـ "الكبير والقوي" في الصناعة ، فإن بروتيناز K منخفض جدًا لدرجة أننا تجاهلنا أهميته لفترة طويلة.مع تفشي وباء التاج الجديد ، ارتفع الطلب على بروتيناز K ، وأصبح العرض في الداخل والخارج بعيدًا عن الاستهلاك ، وأدرك الجميع فجأة أن بروتيناز K مهم جدًا.
ما هو استخدام بروتيناز ك
بروتيناز K هو بروتين سيرين مع نشاط إنزيم محلل للبروتين ويمكنه الحفاظ على النشاط في مجموعة واسعة من البيئات (درجة الحموضة (4-12.5) ، عازلة عالية الملح ، درجة حرارة عالية تصل إلى 70 درجة مئوية ، إلخ).بالإضافة إلى ذلك ، لا يتم تثبيط نشاط بروتيناز K بواسطة SDS واليوريا و EDTA و guanidine hydrochloride و guanidine isothiocyanate وما إلى ذلك ، ويمكن أيضًا أن تعزز كمية معينة من المنظف نشاط بروتيناز K. في العلاج الطبي (تطهير الفيروسات والميكروبات ) ، الطعام (تطرية اللحوم) ، الجلود (تليين الشعر) ، صناعة النبيذ (تصفية الكحول) ، تحضير الأحماض الأمينية (الريش المتحلل) ، استخلاص الأحماض النووية ، التهجين في الموقع ، إلخ ، بروتيناز ك.هناك تطبيقات.التطبيق الأكثر استخدامًا هو استخراج الحمض النووي.
يمكن لـ Proteinase K أن يحلل جميع أنواع البروتينات في العينة ، بما في ذلك الهستونات المرتبطة بإحكام بالأحماض النووية ، بحيث يمكن إطلاق الأحماض النووية من العينة وإطلاقها في المستخلص ، مما يسهل الخطوة التالية من الاستخراج والتنقية.في الكشف عن الحمض النووي الفيروسي ، يعتبر بروتيناز K أحد المكونات المهمة في محلول أخذ عينات الفيروس.يمكن لـ Proteinase K تكسير وتعطيل بروتين غلاف الفيروس ، وهو أكثر أمانًا أثناء مرحلة النقل والكشف ؛بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يحلل بروتيناز K أيضًا RNase ويمنع تدهور الحمض النووي الريبي الفيروسي ويسهل اكتشاف الحمض النووي.
الشهرة الليلية لبروتيناز ك
سواء في مجال البحث العلمي أو في مجال IVD ، فإن استخراج الحمض النووي هو التجربة الأساسية ، لذلك كان بروتيناز K دائمًا وجودًا مهمًا للغاية.ومع ذلك ، في الماضي ، كان بروتيناز K أقل شهرة بكثير من دوره.يرجع جزء كبير من هذا إلى أن علاقة العرض والطلب الخاصة ببروتيناز K كانت مستقرة جدًا.قلة من الناس يعتقدون أن إمداد بروتيناز K سيكون مشكلة.
مع تفشي وباء التاج الجديد ، ارتفع الطلب على اختبار الحمض النووي.اعتبارًا من أواخر يونيو 2020 ، أكملت الصين ما يقرب من 90 مليون اختبار تاج جديد ، وهذا الرقم مثير للقلق على نطاق عالمي.في تجارب استخلاص الحمض النووي ، يكون تركيز بروتيناز K حوالي 50-200 ميكروغرام / مل.بشكل عام ، يستغرق الأمر حوالي 100 ميكروغرام من بروتيناز K لاستخراج عينة من الحمض النووي.في الاستخدام الفعلي ، من أجل زيادة كفاءة استخراج الحمض النووي ، غالبًا ما يتم استخدام بروتيناز K بكمية متزايدة.أدى اكتشاف الحمض النووي لفيروس كورونا الجديد إلى زيادة الطلب على بروتيناز K.تم كسر توازن العرض والطلب الأصلي لبروتيناز K بسرعة ، وأصبح بروتيناز K مادة مهمة للوقاية من الأوبئة بين عشية وضحاها.
صعوبات في إنتاج بروتيناز ك
على الرغم من تطور الوباء ، فقد تم تقدير القيمة المهمة لبروتيناز K من قبل الناس ، إلا أنه من المحرج أنه نظرًا للانخفاض المفرط في مستوى بروتيناز K ، فقد شارك عدد قليل من الشركات المحلية في إنتاج بروتيناز K. تريد إنشاء إنتاج بروتيناز K أثناء عملية الإنتاج ، تم اكتشاف أن بروتيناز K هو بروتين خاص للغاية.من الصعب للغاية توسيع الطاقة الإنتاجية للبروتينيز K في فترة زمنية قصيرة.
يواجه إنتاج بروتيناز K على نطاق واسع الصعوبات التالية
1. انخفاض التعبير
يمكن أن يتحلل بروتيناز K بشكل غير محدد من معظم البروتينات ويسبب سمية خطيرة لخلية مضيفة التعبير.لذلك ، فإن مستوى التعبير عن بروتيناز K منخفض جدًا بشكل عام.يتطلب فحص أنظمة التعبير والسلالات التي تعبر بشكل كبير عن بروتيناز K دورة أطول.
2. مخلفات الأصباغ والأحماض النووية
يقدم التخمير على نطاق واسع كمية كبيرة من الصباغ ومخلفات الحمض النووي المضيف.من الصعب إزالة هذه الشوائب من خلال عملية تنقية بسيطة ، كما أن التنقية المعقدة تزيد من التكلفة وتقلل من معدل الاسترداد.
3. عدم الاستقرار
بروتيناز K ليس مستقرًا بدرجة كافية ، ويمكنه أن يتحلل بالأنزيم نفسه ، ومن الصعب تخزينه بثبات عند 37 درجة مئوية لفترة طويلة بدون عامل وقائي.
4. من السهل أن تترسب
عند تحضير مسحوق بروتيناز K المجفف بالتجميد ، من أجل التأكد من أن المحتوى الصلب من بروتيناز K في المسحوق المجفف بالتجميد كبير ، من الضروري إضافة عامل وقائي مجفف بالتجميد بتركيز عالٍ ، ولكن عندما يصل تركيز بروتيناز K إلى 20 مجم / مل وما فوق ، إنه سهل. يشكل التجميع راسبًا ، مما يؤدي إلى صعوبات كبيرة في تجفيف بروتيناز K مع محتوى صلب عالي.
5. استثمار كبير
يمتلك بروتين K نشاطًا قويًا للبروتياز ويمكنه تحلل البروتياز الأخرى في المختبر.لذلك ، يتطلب بروتيناز K مناطق إنتاج متخصصة ومعدات وموظفين للبحث والتطوير والإنتاج.
محلول بروتين K من XD BIOCHEM
XD BIOCHEM has a mature protein expression and purification platform, and has rich experience in the expression and purification of recombinant proteins and optimization of production processes. Through the rapid formation of a research and development team, the large-scale production process of proteinase K has been overcome. The monthly output of freeze-dried powder is more than 30 KG. The product has stable performance, high enzyme specific activity, and no host cytochrome and nucleic acid residues. Welcome to contact XD BIOCHEM Obtain a trial package (E-mail: sales@xdbiochem.com Tel: +86 513 81163739).
تشمل الحلول التقنية لشركة XD BIOCHEM
باستخدام تكامل بلازميد متعدد النسخ ، يتم اختيار سلالات عالية التعبير بمستوى تعبير 8 جم / لتر ، والتي تتغلب على مشكلة انخفاض مستوى التعبير عن بروتيناز K ؛
من خلال إنشاء عملية تنقية متعددة الخطوات ، تمت إزالة السيتوكروم المضيف وبقايا الحمض النووي من بروتيناز K بنجاح أقل من القيمة القياسية ؛
من خلال الفحص عالي الإنتاجية لتركيبات العازلة الواقية ، تم اختيار مخزن مؤقت يمكنه تخزين بروتيناز K بثبات عند 37 درجة مئوية ؛
تتغلب المخازن المؤقتة للفحص على مشكلة سهولة تجميع بروتيناز K وترسبه بتركيزات عالية ، ويضع الأساس للتجفيف بالتجميد عالي المحتوى من بروتيناز K.

عينة بروتين K XD BIOCHEM

اختبار ثبات بروتيناز XD BIOCHEM K: لن يكون هناك تغيير كبير في النشاط بعد 80 يومًا في درجة حرارة الغرفة

اختبار ثبات بروتيناز XD BIOCHEM K: لن يكون هناك تغيير كبير في النشاط بعد 80 يومًا في درجة حرارة الغرفة

مقارنة بين تأثير استخراج الحمض النووي لبروتيناز XD BIOCHEM K والمنتجات المنافسة.في عملية استخراج الحمض النووي ، يتم استخدام XD BIOCHEM والبروتيناز التنافسي K على التوالي.كفاءة استخراج بروتين XD BIOCHEM K أعلى وقيمة Ct للجين المستهدف أقل.