منتجات

تم طرح الأسئلة بشكل متكرر مؤخرًا: 1. لماذا يمكن استخدام اختبار ONPG للتمييز بين التخمر المتأخر للاكتوز؟2. لماذا تنص المواصفة القياسية الوطنية على أنه من الضروري استخدام 3٪ حديد سكاريد كلوريد الصوديوم (أو حديد ثلاثي السكاريد) لاختبار ONPG؟3. بالنسبة لـ Vibrio parahaemolyticus ، عند إجراء اختبار OPNG ، لماذا يجب إضافة التولوين بالتنقيط وفقًا للمعيار؟ما هي الوظيفة؟

قامت شركتنا بمراجعة الكثير من المعلومات ولخصتها وشاركتها معك أدناه:

المبدأ: الاسم الصيني لـ ONPG هو o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside.يمكن تحلل ONPG إلى الجالاكتوز والأصفر o-nitrophenol (ONP) بواسطة β-galactosidase ، لذلك يمكن اكتشاف نشاط β-galactosidase عن طريق تغيير لون وسط الاستزراع.

اللاكتوز هو السكر الذي تحتاج معظم الكائنات الحية الدقيقة للكشف عنه.يتطلب استقلابه إنزيمين ، أحدهما هو نفاذية الخلية ، ويدخل اللاكتوز إلى الخلايا تحت تأثير بيرميز ؛والآخر هو β-galactosidase ، الذي يحلل اللاكتوز في الماء إلى الجالاكتوز.اللاكتوز والجلوكوز.يمكن أن يعمل β-Galactosidase أيضًا بشكل مباشر على ONPG لتحليله إلى الجالاكتوز والأصفر نيتروفينول (ONP).يمكن القيام بذلك في غضون 24 ساعة ، حتى مع أجهزة تخمير اللاكتوز المتأخرة.لذلك ، فإنه يشرح نتائج الملاحظة لانتقاء الثقافة 1 من ميل الأجار وتلقيحها في دائرة كاملة عند 36 درجة مئوية لمدة 1-3 ساعات و 24 ساعة.إذا تم إنتاج β-galactosidase ، فسوف يتحول إلى اللون الأصفر في 1-3 ساعات ، إذا لم يكن هناك مثل هذا الإنزيم ، فلن يتغير لونه خلال 24 ساعة.

وفقًا للأنزيمين المذكورين أعلاه ، يمكن تقسيم الكائنات الحية الدقيقة إلى الفئات التالية:

1 بكتيريا تخمر اللاكتوز (18-24 ساعة) مع بيرميز و β-galactosidase P + G + ؛

2 تخمير اللاكتوز المتأخر (يستغرق أكثر من 24 ساعة) تفتقر إلى التصاريح ولكنها تمتلك الجالاكتوزيداز: P- G +.

3 مخمرات غير لاكتوز تفتقر إلى كل من بيرميز وجالاكتوزيداز: P- G-.

يمكن استخدام اختبار ONPG لتمييز بكتيريا تخمير اللاكتوز (P-G +) عن بكتيريا اللاكتوز غير المخمرة (PG-) ، مثل:

1 التفريق بين مخمرات اللاكتوز المتأخرة (P- G +) والمخمرات الخالية من اللاكتوز (P- G-).

(أ) Citrobacter (+) و Salmonella arizonae (+) من السالمونيلا (-).

(ب) الإشريكية القولونية (+) من الشيغيلة سوني (-).

لماذا تم إجراء اختبار ONPG باستخدام مزرعة ليلية على 3 ٪ من كلوريد الصوديوم ثلاثي السكاريد (الحديد ثلاثي السكريات)؟لقد استعانت شركتنا بالكثير من المعلومات ، لكن لا يوجد بيان واضح.فقط على موقع FDA على الويب ، تمت كتابة ما يلي: "تلقيح الثقافات المراد اختبارها على منحدرات أجار ثلاثية من الحديد والسكر واحتضانها لمدة 18 ساعة عند 37 درجة مئوية (أو درجة حرارة مناسبة أخرى ، إذا لزم الأمر). ويمكن أيضًا استخدام٪ لاكتوز ".يعني: تم تلقيح بكتيريا الاختبار على وسط الحديد ثلاثي السكاريد وتم تربيتها عند 37 درجة مئوية لمدة 18 ساعة.من المقبول أيضًا استخدام مائل أجار المغذيات (أو غيرها) التي تحتوي على 1٪ لاكتوز.لذلك ، يُستنتج أن وسط الحديد ثلاثي السكاريد يحتوي على اللاكتوز.بعد النمو بين عشية وضحاها ، أنتجت البكتيريا إنزيم β-galactosidase النشط الجيد.باستخدام هذه البكتيريا ، يمكن تحلل ONPG بواسطة β-galactosidase بشكل أسرع.الظاهرة التجريبية أسرع وأفضل تتجلى.بالإضافة إلى ذلك ، فإن إضافة التولوين والحمام المائي بالتنقيط لمدة 5 دقائق كلها من أجل إطلاق β-galactosidase بالكامل.