منتجات

قمنا بتطوير نظام توصيل RNA صغير متداخل جديد (siRNA) باستخدام مركب ثلاثي مع البولي إيثيلين أمين (PEI) وحمض γ-polyglutamic (γ-PGA) ، والذي أظهر تأثير إسكات وعدم وجود سمية خلوية.كانت المجمعات الثنائية لـ siRNA مع PEI حوالي 73-102 نانومتر في حجم الجسيمات و 45-52 مللي فولت في ζ-المحتملة.زاد تأثير إسكات معقدات siRNA / PEI مع زيادة PEI ، وأظهرت مجمعات siRNA / PEI بنسبة شحنة أكبر من 16 ضربة قاضية كبيرة للوسيفيراز في خط خلايا سرطان القولون بالفأر الذي يعبر بانتظام عن لوسيفيراز (خلايا كولون 26 / لوك).ومع ذلك ، لوحظت سمية خلوية قوية وتراص دموي في مركب siRNA / Lipofectamine ومركب siRNA / PEI16.تم الإبلاغ عن إعادة شحن المجمعات الكاتيونية بمركب أنيوني لتكون طريقة واعدة للتغلب على هذه السميات.لذلك قمنا بإعداد مجمعات ثلاثية من siRNA مع PEI (نسبة الشحن 16) عن طريق إضافة γ-PGA لتقليل السمية الخلوية وتقديم siRNA.كما هو متوقع ، انخفضت السمية الخلوية للمجمعات الثلاثية مع زيادة محتوى γ-PGA ، مما قلل من إمكانات ζ للمجمعات.تم اكتشاف تأثير إسكات قوي مشابه لمركب siRNA / Lipofectamine في المجمعات الثلاثية بما في ذلك γ-PGA بشحنة سطحية أنيونية.تم تأكيد التضمين العالي للمجمعات الثلاثية في خلايا القولون 26 / لوك باستخدام الفحص المجهري الفلوري.بعد تحقيق ضربة قاضية للجين المنقول خارجيًا ، تم تقييم قدرة المركب على التوسط في ضربة قاضية لجين التدبير المنزلي الداخلي ، glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) ، في خلايا B16-F10.أظهر المجمع الثلاثي (مجمع siRNA / PEI16 / γ-PGA12) تأثير ضربة قاضية لـ GAPDH.وبالتالي ، قمنا بتطوير نظام توصيل siRNA مفيد.