منتجات

LecA (PA-IL) عبارة عن مادة لاصقة ولصق سامة للخلايا تنتجها Pseudomonas aeruginosa والتي تربط الجالاكتوزيدات الكارهة للماء بخصوصية عالية وتقارب.باستخدام دمج ترجمة lecA-egfp وتحليل لطخة مناعية للمصفوفة خارج الخلية للغشاء الحيوي ، نظهر أن lecA يتم التعبير عنه في الخلايا المزروعة بالأغشية الحيوية.في فحوصات الأغشية الحيوية الثابتة على كل من البوليسترين والفولاذ المقاوم للصدأ ، تم تقليل عمق الأغشية الحيوية وتغطية السطح عن طريق طفرة lecA وتعزز في سلالة LecA المفرطة في الإنتاج PAO-P47.تم أيضًا تثبيط تغطية السطح البيوفيلم بواسطة السلالة الأم ، PAO-P47 ولكن ليس متحولة lecA على كوبونات الصلب عن طريق النمو في وجود أيزوبروبيل بيتا- D- ثيوجالاكتوزيد (IPTG) أو ف نيتروفينيل ألفا- D- غالاكتوزيد ( NPG).علاوة على ذلك ، يمكن تشتيت الأغشية الحيوية الناضجة من النوع البري المتكون في غياب هذه الجالاكتوزيدات الكارهة للماء عن طريق إضافة IPTG.في المقابل ، لم يكن لإضافة p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) الذي له انجذاب كبير لمكتبة P. aeruginosa LecB (PA-IIL) أي تأثير على تكوين الأغشية الحيوية أو انتشارها.لم يتأثر نمو العوالق لـ P. aeruginosa PAO1 بوجود IPTG أو NPG أو NPF ، ولم تكن السلالة قادرة على استخدام هذه السكريات كمصادر للكربون ، مما يشير إلى أن التأثيرات الملحوظة على تكوين الأغشية الحيوية كانت بسبب التثبيط التنافسي لـ LecA-ligand ربط.تم الحصول على نتائج مماثلة أيضًا للأغشية الحيوية المزروعة في ظل ظروف تدفق ديناميكي على كوبونات فولاذية ، مما يشير إلى أن LecA يساهم في بنية P. aeruginosa biofilm في ظل ظروف بيئية مختلفة.

تم الكشف عن alpha-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) القادر على إطلاق بقايا t-fucosyl من السلسلة الجانبية لـ oligosaccharides xyloglucan في أوراق نباتات Arabidopsis.علاوة على ذلك ، تمت تنقية alpha-L-fucosidase مع خصوصية ركيزة مماثلة من أوراق الملفوف (Brassica oleracea) لتقديم نطاق واحد على SDS-PAGE.تم الحصول على تسلسلين من الببتيد من هذا النطاق البروتيني ، وتم استخدامهما لتحديد ترميز جيني أرابيدوبسيس لـ alpha-fucosidase الذي نقترحه لاستدعاء AtFXG1.بالإضافة إلى ذلك ، تم العثور أيضًا على جين أرابيدوبسيس مع تماثل مع alpha-L-fucosidases المعروف ، واقترحنا تسميته باسم AtFUC1.تم التعبير عن كل من AtFXG1 و ATFUC1 بشكل غير متجانس في خلايا Pichia pastoris وأنشطة alpha-L-fucosidase التي تم إفرازها في وسط الثقافة.كان alpha-L-fucosidase المشفر بواسطة AtFXG1 نشطًا ضد السكريات القليلة من xyloglucan XXFG وكذلك ضد 2'-fucosyl-lactitol ولكن ليس ضد p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside.ومع ذلك ، فإن AtFUC1 المعبر عنه بشكل غير متجانس كان نشطًا فقط ضد 2'-fucosyl-lactitol.وبالتالي ، يجب أن يكون الأول مرتبطًا بعملية التمثيل الغذائي للزيلوغلوكان.